二甲雙胍增強索拉非尼敏感性，抑制肝癌小鼠的術后復發和轉移
01
文章背景簡介
BACKGROUND INTRODUCTION
肝細胞癌（HCC）發病率很高，在男性癌癥患者中排名第五位，在女性中排名第七位。目前，手術切除被認為是HCC的主要治療方法。然而，術后復發和轉移仍然是HCC長期生存的主要障礙。索拉非尼是治療晚期肝癌的一線口服多激酶抑制劑。有證據表明，索拉非尼可以通過阻斷Raf ／ MEK ／ ERK信號通路抑制腫瘤細胞增殖，也可以靶向酪氨酸激酶受體血管內皮生長因子受體－2 （VEGFR－2）或血小板衍生生長因子受體（PDGFR）抑制血管生成。然而，由于其耐藥性，索拉非尼的治療效果大打折扣，藥物利用率非常低。缺氧環境是實體瘤耐藥的重要因素之一。許多證據表明，缺氧誘導因子（HIFs）對腫瘤細胞適應低氧環境至關重要。最近的研究結果顯示：索拉非尼可以降低HIF－1α的表達上調，促進缺氧反應，導致HIF－2α上調。索拉非尼誘導的HIF－2α高表達是缺氧時肝癌細胞耐藥的主要原因。相對低劑量的索拉替尼通過降低腫瘤抑制基因HTATIP2（也稱為TIP30）促進HCC入侵和轉移，然而到目前為止，HIF－2α和TIP30之間的關系尚未報道。
二甲雙胍是一種廣泛用于治療2型糖尿病的藥物，因近年來陸續發現的各種作用而被譽為“一代神藥”。最近有文章指出二甲雙胍可能與降低糖尿病患者的癌癥發生率有關，包括前列腺癌、乳腺癌、胰腺癌和肝癌。此外，也有文章報道二甲雙胍可靶向NLK （Nemo－like kinase）抑制非小細胞肺癌（NSCLC）細胞增殖和干細胞性。
2016年，天津醫科大學腫瘤研究所肝膽外科的Abin You等人，在《Journal of Hematology ＆ Oncology》雜志（IF2018＝8．731，醫學1區）發表了題為“Metformin sensitizes sorafenib to inhibit postoperative recurrence and metastasis of hepatocellular carcinoma in orthotopic mouse models”的文章。本文證明了二甲雙胍可以提高肝癌細胞對索拉非尼的敏感性，抑制手術切除后肝癌的復發和轉移。
02
所用到的主要方法
METHODS
1．Western blot
2．CCK8檢測
3．CHIP
4．流式細胞術
5．免疫組化
6．HE染色
7．動物模型
03
文章主要內容摘要
ABSTRACT
背景：索拉非尼被認為是治療晚期肝癌的標準藥物。然而，由于副作用，許多患者不得不減少劑量或終止使用索拉非尼。此外，許多患者對索拉非尼具有耐藥性。因此，研究其內在原因，探討索拉非尼的耐藥機制，并尋求提高其療效的潛在策略是非常必要的。
方法：通過免疫印跡檢測低氧誘導因子（HIF－2α）、TIP30、N－cadherin、pAMPK的蛋白表達。細胞活力檢測來研究二甲雙胍和索拉非尼對細胞增殖的影響。采用Annexin V－FITC凋亡檢測方法檢測二甲雙胍和索拉非尼對細胞凋亡的影響。使用基因沉默和染色質免疫沉淀反應試驗探究HIF－2α和TIP30之間的關系。為探討二甲雙胍和索拉非尼對荷瘤小鼠肝癌術后復發及肺轉移的影響，術后連續37天，口服二甲雙胍或索拉非尼每日一次，切除腫瘤植入的肝葉。免疫組化檢測CD31、Ki67、TUNEL。
結果：在蛋白水平，二甲雙胍與索拉非尼聯用可以減少HIF－2α表達。通過基因沉默的方法發現TIP30的表達受到HIF－2α的調控，染色質免疫沉淀反應試驗表明在缺氧條件下HIF－2α可以結合到TIP30啟動子上。CCK8細胞活力測定和Annexin V－FITC凋亡測定表明：二甲雙胍聯合索拉非尼抑制細胞增殖，促進細胞凋亡。此外，在體內和體外實驗，聯合治療可以抑制上皮－間質轉化（EMT）過程。此外，二甲雙胍聯合索拉非尼可顯著減少小鼠原位肝細胞癌模型術后復發和肺轉移。聯合治療可抑制CD31和Ki67表達，但促進TUNEL表達。總之，在缺氧條件下，低劑量的索拉非尼可以下調HIF－2α上調TIP30來促進肝癌細胞的遷移和侵襲，而二甲雙胍可以增強肝癌細胞對索拉非尼的敏感性，增強藥物治療效果。
▼
相關鏈接
▼
J Hematol Oncol：二甲雙胍增強三氧化二砷抑制肝內膽管癌的作用：p38 MAPK、ERK3和mTORC1
分享
請輸入評論內容...
請輸入評論/評論長度6~500個字
圖片新聞
